Skip to main content

Гістологія

На лабораторних щурах Вістар

Надано лабораторією кафедри патології медичного факультету Університету Рібейрау-Прету (Бразилія) - USP

histology

01

Група
Дослідження

Експериментатори : R.Mené,M.Kim,A.Tenenbaum

Кількість, N= 29 лабораторних щурів Вістер
Вага : 421 г

Походження тварин : Biotério Central of Campus of Ribeirão Preto of São Paulo University
Підтримка : Experimental Pathology Lab of Pathology Department on Medicine School of Ribeirão Preto – USP
Утримання тварин : поліпропіленові бокси
Їжа тварин : базова лабораторна дієта та вода
Показники освітлення : природні світло/темрява цикли при контрольованих основних умовах
Еспериментатори : A.Tenenbaum,R.Mené,Kim

pathology department

02

Препарація Тварин та Гістологічні Зразки

Звичайна Мікроскопія

Мишей евтаназували в CO2-камерах.

  • Розріз шкіри лезом № 23
  • Знаходження та виділення претибіального м'яза за допомогою ножиць Метценбаума
  • Перетин сухожиль ножицями Майо.
  • Фіксація частин м'язів на зрізах коркового дуба
  • Закріплення з використанням 50% розчину формальдегіду - 10% буферу і 50% чистого парафіну для звичайного оптичного мікроскопічного дослідження.
  • Фарбування зрізів як рутинний гістологічний процес.
  • Використаний мікротом: Leika RM 2155
  • Забарвлення зрізів м'язів за допомогою:

-гематоксилін-еозин
-Трихромія Массона
-і червоний пікро-сіріус.

  • Гістологічне дослідження проводили за допомогою звичайного мікроскопа (Olympus BH-2).
  • Спостереження під поляризованою лампою
  • Фотодокументація здійснювалася за допомогою мікроскопа Leika DMR, з'єднаного з цифровою фотокамерою Leika CD 300F і сумісним комп'ютером.
microtome

03

Матеріал

6 боксів зі щурами
  • Тварин розділили по 6 ящиках таким чином, щоб у ящиках з номерами від 1 до 5 було по 5 щурів, а в ящику під номером 6 - 4 щури.
  • Усім тваринам проводили оцінку ходи за відбитком сліду на спеціальному папері та попереднім зануренням задніх лап у мильний розчин.
  • В боксі 1 була контрольна група, яка отримувала аплікацію 0,1 мл фізіологічного розчину (NaCl 0,9%) на правий претибіальний м'яз.
  • Миші з боксів 2-5 отримували 0,1 мл основного продукту Endopeels Original на той самий м'яз, що й контрольна група.

  • У боксі 6 було 4 щури, кожному з яких підшкірно вводили по 0,5 мл основного продукту Endopeels.

  • All the animals were submitted to walking evaluation before and after their respective injections.

boxes for rats

04

Методи

Тварин препарували через 10 днів - 1 місяць - 3 місяці - 7 місяців
sacrifice table

05

Контроь

Після ін'єкції 0,5% NaCl

Коментар: Нічого декларувати після введення фізіологічного розчину

without treatment

Л: Претибіальний м'яз - без лікування

П: Претибіальний м'яз - після 0,1 мл NaCl 0,9% в/м

06

10 днів після ін'єкції Ендопіл

Box 2

Через 10 днів після ін'єкції Ендопіл 0,1 мл в правий претибіальний м'яз.

Тут можна побачити утворення вакуолей, які оточені лімфоцитами. Вакуолі відрізняються від некрозу тканини. Присутність лімфоцитів пов'язана з проникністю клітинних мембран.

 

left control- 100xD10

Л : Контроль -100x 10 днів

right 100xD10

П:100x10 днів

right200xx

П :200x10 днів

right400xxD10

П :400x10 днів

07

1 місяць після ін'єкції Ендопіл

Box 3

Через 1 місяць після ін'єкції Ендопілу 0,1 мл у правий претибіальний м'яз.
Те, що видно на знімках чорним кольором, не є некрозом, як можуть собі уявити деякі науковці!
Насправді, слід взяти до уваги 4 висновки

  • артефакт забарвлення
  • відсутність некрозу
  • апоптоз
  • біорегенеративний процес
left control- 100xD30

Л : Контроль-100x30 днів

right 100x

П:100x30 днів

right400xxD30

П :400x30 днів

08

3 місяці після ін'єкції Ендопіл

Бокс 4

Через 3 місяці (90 днів) після ін'єкції Ендопіл 0,1 мл в правий претибіальний м'яз.

left control- 100xD90

Л : Контроль-100x90 днів

right 100x

П:100x90 днів

09

7 місяців після ін'єкції Ендопіл

Бокс 5

7 місяців (210 днів) після ін'єкції 0,1 мл Ендопіл в правий претибіальний м'яз.

Повна Restitutio ad integrum через 7 місяців

left control- 100xD210

L : Контроль-100x210 днів

right 100x

П:100x210 днів

L Control 50xD210

Л :Контроль 50x210 днів

R50X-D210

П:50X-210 днів


10

Ін'єкція Ендопіл в підшкірну клітковину

Бокс 6

0,5 мл (5x 0,1 мл) підшкірна ін'єкція Ендопіл в праву підшкірну претибіальну ділянку.

Л:200x-Контроль-ПШ

R-D10-SC-200X

П-10днів-ПШ-200X

R-D30-SC-200X

П-30днів-ПШ-200X

R-D90-SC-200X

П-90днів-ПШ-200X

R-D210-SC-200X

П-210днів-ПШ-200X

R-D210-SC-400X

П-210днів-ПШ-400X


conclusions
    • Ендопіл викликає селективний оборотний міофіброліз і запальну реакцію протягом 1 місяця, приблизно
    • М'язові зміни є оборотними майже в повному обсязі
    • М'язи є кращим місцем для ін'єкції Ендопіл через більшу ефективність, контрольованість і тривалість його дії
    • В ході дослідження не було виявлено жодного некрозу чи абсцесу.

Інші дослідження в Гінекології 

Other Study